武汉植物学研究 2004, 22 (5) : 463 ～ 468

    J ourna l of Wuhan B otan ica l Resea rch

    丹参离体微繁技术研究

    冯玲玲, 郭胜娟, 周诗毅, 范美华, 周吉源X

    (华中师范大学生命科学学院, 武汉 430079)

    摘 要: 以丹参(S alv ia m il t iorrh iz a Bunge)离体幼茎、叶、叶柄为外植体, 对其丛生芽、不定芽的诱导和增殖、生根、移栽等方面进行系统研究, 探讨了有关丹参的离体快速微繁技术。试验表明:M S+ 62 BA 1. 0 mg? L 是诱导初代培

    养的芽产生丛生芽的最佳培养基, 其诱导生芽率为 100% , 丛生芽增殖的最佳培养基为M S+ 62 BA 1. 0 mg? L +

    NAA 0. 01 mg? L ; 以叶为外植体, 用M S+ 62 BA 0. 5～ 2. 0 mg? L 诱导不定芽可取得较好效果, 其诱导生芽率为

    100% , 不定芽增殖的最佳培养基为M S+ 62 BA 1. 0 mg? L , 其增殖倍数达 24 倍; 诱导生根较好的培养基为 1? 2M S

    + 0. 1mg? L IBA , 移栽先水培再土培, 成活率可达 100%。

    关键词: 微繁技术; 离体; 丹参

    中图分类号: Q 945. 4 文献标识码: A 文章编号: 10002470X (2004) 0520463206

    Research on Propaga t ive Techn ique of Sa lvia m il t ior rh iza Bunge in vit ro

    FEN G L ing2 L ing, GUO Sheng2 Juan, ZHOU Sh i2Yi, FAN M ei2 Hua, ZHOU J i2Yuan

    X

    (Col leg e of L if e S ciences, Central Ch ina N orm al U niversity , W uhan 430079, Ch ina)

    Abstract : U sing the young stem , leaf, and leaf2stalk of S a lv ia m il t iorrh iz a Bunge as the

    exp lan t s, the induct ion and m u lt ip licat ion of bu sh2 bud and adven t it iou s bud, roo t ing induct ion

    and t ran sp lan t ing are system at ically studied, a ser ies of p ract ical p ropagat ion techn iques of S a lv ia

    m il t iorrh iz a Bunge in v itro are developed . The resu lt s show ed: M S+ 62 BA 1. 0 m g? L is mo st

    su itab le fo r induct ion of bu sh2 bud w ith the 100% rate of induct ion , it s best m u lt ip licat ion

    m edium isM S+ 62 BA 1. 0 m g? L + NAA 0. 01 m g? L w ith 15 t im es of b reeding;M S+ 62 BA 0. 5-

    2. 0 m g? L is bet ter fo r inducing adven t it iou s2 bud, on w h ich it s rate of induct ion is 100% , it s best

    m u lt ip licat ion m edium isM S+ 62 BA 1. 0 m g? L w ith 24 t im es of b reeding; the bet ter m edium fo r

    roo t ing induct ion is 1? 2M S+ 0. 1 m g? L IBA , seedlings shou ld be cu ltu red several days by w ater

    befo re by so il, the 100% living rate of seedling can be ob tained .

    Key words: P ropagat ion techn ique; In v itro; S a lv ia m il t iorrh iz a Bunge

    丹参(S a lv ia m il t iorrh iz a Bunge) 属, 唇形科

    (L em iaceae, L ab iatae)鼠尾草属(S a lv ia )的多年生

    草本植物, 作为传统中药在我国沿用已久。近年来随

    着丹参制剂在国内、国际心血管药物市场占有量不

    断提高, 以及新的应用价值不断被发现[ 1 4 ]

    , 对丹参

    的需求和开发也迅速扩大; 但是野生丹参资源有限,各地虽有栽培品种, 而栽培丹参的生长周期长和有

    效成分含量低, 品质退化严重。目前有关丹参的研究

    大多集中在外植体的诱导及提高其有效成分的研

    究[ 5 7 ]

    , 其组织培养方面的研究也有一些报道[ 8 11 ]。

    在实际生产中主要用其根来繁殖, 而根正是药用部

    分, 用根繁殖不仅浪费药材, 而且成苗时间长、成苗

    率低, 而丹参的微繁技术由于仍存在诸如技术上繁

    殖倍数较低、苗成活率低等问题导致成本高、批量生

    产难而限制其应用推广。

    笔者对丹参离体微繁技术进行了系统的研究,X

    收稿日期: 2003210228, 修回日期: 2004205221。

    作者简介: 冯玲玲(1969- ) , 女, 博士研究生, 从事植物发育遗传及细胞工程研究。

    通讯作者。

    ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.旨在从芽的增殖而得到大量的幼苗, 并选择合适的

    生根培养基、移栽方法以提高苗的成活率, 为生产提

    供一套适应丹参大规模生产的切实可行的、高效、稳

    定的微繁技术方法。

    1 材料和方法

    1 . 1 材料

    采自湖北蕲春药业基地春初萌发的丹参幼嫩枝

    条。

    1 . 2 实验方法

    1 . 2 . 1 无菌材料的获得 取幼嫩枝条, 用自来水冲

    洗干净, 并用软毛刷轻轻刷洗; 然后在超静工作台

    上, 先用 75%酒精消毒 0. 5～ 1 m in, 无菌水冲洗 2

    次, 再用0. 1%的升汞消毒10m in, 无菌水冲洗4～ 5

    次, 然后将枝条剪成带有腋芽约0. 5～ 1 cm 的小段,从小段中间纵切为二, 每1 片上均含有1 个腋芽, 最

    后按形态学顶端向上接入M S 或1? 2M S 培养基中,放在培养室中培养。5 d 后腋芽会萌发, 至20 d 后小

    苗约 3～ 4 cm 高, 有 6～ 8 片深绿色叶, 以此获得无

    菌试管苗可作为实验材料。

    1 . 2 . 2 培养基 以M S 为基本培养基, 不同培养阶

    段附加不同的种类和浓度的植物生长调节物质。

    1 . 2 . 3 培养条件 培养室温度(25±2)℃、每天光

    照10～ 12 h, 光照强度2 000～ 3 000 lx。

    2 结果与分析

    2 . 1 丛生芽的诱导和增殖

    2 . 1 . 1 丛生芽的诱导 将带有腋芽的茎段, 接种于

    M S 附加不同配比的植物激素的培养基上诱导生

    长, 不断发生腋芽而成丛生芽, 25 d 后统计长出丛

    生芽的茎段数 ......